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中文名：兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒
別名：兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA Kit
供應商：上海遠慕
規(guī)格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6個月
適用范圍：本試劑盒僅供科研使用，不得用于臨床。
ELISA試劑盒種屬：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等。
檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
產品用途：用于測定人血清,血漿,組織及相關液體樣本中的含量或活性。
兔子蛋白聚糖4（PRG4）ELISA試劑盒性能特點：靈敏性高、特異性強、重復性好。

兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA檢測試劑盒標本要求：
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
3.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可向客服索取說明書
4.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
5.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
6.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
7.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
8.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
9.溫育：操作同3。
10.洗滌：操作同5。
11.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
12. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
13. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理方法：
1、血清-----室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心
2、血漿-----應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心
3、細胞培養(yǎng)上清---檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清
4、組織標本-----切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用
5、培養(yǎng)細胞----- 檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒操作步驟：
1、加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl，然后再加待測樣品10µl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
2、溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
5、加酶：每孔加入酶標試劑50µl，空白孔除外。
6、顯色：每孔先加入顯色劑A50µl，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
7、終止：每孔加終止液50µl，終止反應(此時藍色立轉黃色)。
8、測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒注意事項：
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本od值大于標準品孔*孔的od值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

：
1．特異性強：不與其它細胞因子反應。
2．重復性好：板內、板間變異系數(shù)均小于10%。
3．穩(wěn)定性高：實驗效果很穩(wěn)定。
4．超靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品，稀釋度和樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒組成及試劑配制：
1.酶聯(lián)板(Assay plate )：一塊(96孔)。
2.標準品(Standard)：2瓶(凍干品)。
3.樣品稀釋液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。
4.生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent)：1×10ml/瓶。
5.辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent)：1×10ml/瓶。
6.生物素標記抗體(Biotin-antibody)：1×120μl/瓶(1：100)
7.辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin)：1×120μl/瓶(1：100)
8.底物溶液(TMB Substrate)：1×10ml/瓶。
9.濃洗滌液(Wash Buffer)：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.終止液(Stop Solution)：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

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