質粒中量提取試劑盒，Plasmid Midi Kit(2)詳細介紹

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名稱：質粒中量提取試劑盒

品牌：Omega

供應商：上海遠慕

用途：從15-50ml細菌培養(yǎng)液中純化200-250ug高純度的質粒DNA

英文名/型號：Plasmid Midi Kit(2)

英文名/型號：Plasmid Midi Kit(10)

英文名/型號：Plasmid Midi Kit(25)

英文名/型號：Plasmid Midi Kit(100)

質粒中量提取試劑盒特點：  

1.不需要使用有毒的苯酚，lvfang等試劑，也不需要乙醇沉淀?？焖佟?方便、從50-70 ml大腸桿菌LB((Luria-Bertani)培養(yǎng)液中，可快速提取150μg -600μg純凈的高拷貝質粒DNA，提取率達80-90 %。

2.獲得的質粒產(chǎn)量高，濃度高，超螺旋比例高，純度好，可直接用于酶切、轉化、PCR、體外轉錄、測序等各種分子生物學實驗。 3. 內(nèi)毒素含量極低（< 0.1 EU/μg DNA），可直接應用于細胞轉染。

Plasmid Midi Kit(2)操作注意事項：

1.提取的質粒量與細菌培養(yǎng)濃度、質?？截悢?shù)等因素有關。如果所提質粒為低拷貝質?；虼笥?0kb 的大質粒，應加大菌體使用量，同時按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。

2.提取大質粒時操作動作要輕柔，應該使用剪大了開口的吸頭，防止機械剪切對DNA的損壞。

3.DNA沉淀液沉淀離心后，可能看不到明顯沉淀。如未見沉淀，擔心DNA丟失，可保留上清液，待完成全部操作后電泳鑒定，以確定是否獲得終產(chǎn)物（數(shù)百微克DNA離心沉淀在管的側壁上，可能無法看到明顯團塊）。

4.得到的質粒DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260值為1相當于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶，也可能為2條或者多條DNA條帶，這主要是不同程度的超螺旋構象質粒泳動位置不一造成，與提取物培養(yǎng)時間長短、提取時操作劇烈程度等有關。

5.質粒DNA確切分子大小， 必須酶切線性化后，對比DNA分子量Marker才可以知道。處于環(huán)狀或者超螺旋狀態(tài)的質粒，泳動位置不確定，無法通過電泳知道確切大小。

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