抗原抗體反應(yīng)—凝集反應(yīng)(agglutination)指顆粒性抗原(細(xì)菌、細(xì)胞等)與相應(yīng)的抗體,或可溶性抗原(亦可用抗體)吸附于與免疫無關(guān)的載體形成致敏顆粒(免疫微球)與相應(yīng)的抗體(或抗原),在有適量電解質(zhì)存在下,形成肉眼可見的凝集小塊。
1.直接凝集反應(yīng)(direct agglutination)是顆粒性抗原又稱凝集原與相應(yīng)抗體直接結(jié)合所呈現(xiàn)的凝集現(xiàn)象,如紅細(xì)胞和細(xì)菌凝集試驗(yàn)。主要有玻片法、試管法及微量凝集法。玻片法為定性試驗(yàn),方法簡(jiǎn)便快速,常用已知抗體檢測(cè)未知抗原,應(yīng)用于菌種鑒定,分型及人紅細(xì)胞ABO血型測(cè)定等;試管法通常為半定量試驗(yàn),常用已知抗原檢測(cè)待檢血清中有無相應(yīng)抗體及其相對(duì)含量,以幫助臨床診斷和分析病情。例如臨床實(shí)驗(yàn)室常用的診斷傷寒或副傷寒的肥達(dá)氏試驗(yàn)(Widal test);診斷布魯氏菌病的瑞特氏實(shí)驗(yàn)(Wrig test)及診斷斑疹傷寒及恙蟲病的外裴二氏試驗(yàn)(Weil felix test)等。
2.間接凝集反應(yīng)(indirect passive agglutination)是可溶性抗原或抗體吸附于與免疫無關(guān)的微球載體上,形成致敏載體(免疫微球),與相應(yīng)的抗體或抗原在電解質(zhì)存在的條件下進(jìn)行反應(yīng),產(chǎn)生凝集,稱為間接凝集或被動(dòng)凝集;實(shí)驗(yàn)室常用的載體微球有人O型血紅細(xì)胞、綿羊或家兔紅細(xì)胞、聚苯乙烯乳膠、活性炭等,根據(jù)應(yīng)用的載體種類不同,分別稱為間接血凝、間接乳膠凝集及間接炭凝試驗(yàn)等。本試驗(yàn)主要用于某些傳染病如鉤端螺旋體抗原和原發(fā)性肝癌的早期診斷。間接凝集反應(yīng)擴(kuò)大了凝集反應(yīng)的應(yīng)用范圍,其發(fā)展取決于載體,修飾載體使其帶有化學(xué)活性基團(tuán),或選用吸附力強(qiáng)、穩(wěn)定性高和帶有色素的載體,必將演化出新的方法。
3.間接凝集抑制試驗(yàn)(indirect agglutination inhibition test)將可溶性抗原與相應(yīng)抗體預(yù)先混合并充分作用后,再加入抗原致敏的載體,此時(shí)因抗體已被可溶性抗原結(jié)合,阻斷了抗體與致敏載體上的抗原結(jié)合,不再出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,稱為間接凝集抑制試驗(yàn)。臨床常用的免疫妊娠試驗(yàn)(immune pregnancy test)即屬此類。若以紅細(xì)胞作為載體則稱為間接血凝抑制試驗(yàn)。
所有上述凝集試驗(yàn)均可劃分為正向和反向凝集試驗(yàn),以已知抗原測(cè)抗體的凝集試驗(yàn)為正向凝集試驗(yàn),通常“正向"兩字省略,反之,為反向凝集試驗(yàn)。
4.協(xié)同凝集試驗(yàn)(co-agglutination)以金黃色葡pu萄球菌為載體,利用其細(xì)胞壁中的A蛋白(SPA)具有結(jié)合人及多種哺乳動(dòng)物IgG Fc段的特性。將特異性抗體結(jié)合至金黃色葡pu萄球菌菌體,其Fab段暴露于菌體表面,遇到相應(yīng)抗原時(shí)與之結(jié)合,即可導(dǎo)致金黃色葡pu萄球菌凝集。稱為協(xié)同凝集試驗(yàn)。常用于早期診斷流腦、傷寒、菌痢及布魯氏菌病。
5.抗人球蛋白試驗(yàn)(anti-human globulin reaction)機(jī)體受抗原刺激后,除可產(chǎn)生完wan全抗體外,在某些病人(先天性溶血性貧血)也可產(chǎn)生不完wan全抗體(IgG),后者雖能與抗原結(jié)合,但不出現(xiàn)肉眼可見反應(yīng)現(xiàn)象。Coomb等把含有不完wan全抗體血清球蛋白注射到異種動(dòng)物體內(nèi),使其產(chǎn)生抗人球蛋白抗體,將該抗人球蛋白抗體加入到顆粒性抗原與相應(yīng)的不wan全抗體復(fù)合物中,就能出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象,稱為抗人球蛋白試驗(yàn),又稱Coomb's試驗(yàn)。主要用于檢測(cè)Rh抗體及布魯氏菌抗體。